小鼠原代食管上皮原代細胞
細胞培養(yǎng)操作：
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)
傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法：
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4.待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
商品屬性：
規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 貨號 | EY-XY3627 |
種屬來源 | 小鼠 | 組織來源 | 食管 |
生長特性 | 貼壁生長 | 形態(tài)特征 | 鋪路石狀細胞，不規(guī)則 |
形態(tài)：鋪路石狀細胞，不規(guī)則
培養(yǎng)基：小鼠食管上皮細胞wan全培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃
傳代特征：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)
細胞基本屬性：
種屬來源：小鼠
組織來源：食管食管
生長特性：貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：
產(chǎn)品貨期：5-6周左右
運輸方式：T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應(yīng)限制：僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹：:小鼠食管上皮細胞采用機械分離法結(jié)合組織貼塊法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，小鼠食管上皮細胞分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變?yōu)閺?fù)層，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮，耐摩擦，有保護作用。在食管與胃賁門交界處，復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復(fù)層扁平上皮細胞覆蓋，其頂端細胞膜和細胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障，防止食管內(nèi)容物的滲入。特別的是，層屏障使表層細胞的基質(zhì)外側(cè)細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學(xué)上講，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層；其中，僅基底層的細胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標(biāo)記的依序表達。食管上皮細胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。
原代細胞培養(yǎng)的主要步驟包括：
?一、剝離組織，去除外膜、結(jié)締組織等?：將組織從動物體中取出，并去除可能存在的外膜或結(jié)締組織等雜質(zhì)。
二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。
三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進行消化。消化時間可根據(jù)具體實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。
?四、吹打分散后，過濾、計數(shù)?：將消化后的細胞吹打到一個離心管中，然后過濾、計數(shù)。
五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?：將計數(shù)后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
病毒性出血性敗血癥病毒(VHSV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) | BV2-Luc熒光素酶標(biāo)記的小鼠小膠質(zhì)細胞 |
沃氏葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | 支原體PCR檢測試劑盒，100 次 |
烏梅探針法PCR鑒定試劑盒 | 支原體PCR檢測試劑盒，20 次 |
烏梢蛇染料法熒光定量PCR試劑盒 | 支原體PCR檢測試劑盒，50 次 |
烏梢蛇探針法熒光定量PCR試劑盒 | 支原體高效清除劑 2000 × |
烏探針法PCR鑒定試劑盒 | 支原體預(yù)防試劑，2000 × |
無齒類圓線蟲PCR檢測試劑盒 | 重組大鼠血管內(nèi)皮生長因子 VEGF 164 |
無齒類圓線蟲PCR檢測試劑盒 | 重組人白介-13 |
無齒類圓線蟲PCR檢測試劑盒供應(yīng) | 重組人轉(zhuǎn)化生長因子RH TGF-β1 |
無齒類圓線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 重組人胰島 |
無齒類圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | 重組人白細胞介-2（凍干粉GMP級） |
無漿體(無形體)通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | 重組人白細胞介-4 |
無漿體(無形體)通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | 小鼠原代食管上皮原代細胞重組人白細胞介-4 |
無漿體通用PCR檢測試劑盒 | 重組人表皮生因子 |
無漿體通用PCR檢測試劑盒價格 | 重組人粒巨噬細胞集落刺激因子 |
點擊放大
